Способ культивирования стволовых клеток млекопитающих

Название разработки

Способ культивирования стволовых клеток млекопитающих.

Новизна

На основе разработанного метода будет создана универсальная технология практического получения клеточного препарата для лечения глиальных опухолей головного мозга.

Назначение

Метод может быть использован при лабораторной доклинической молекулярно-биологической оценке терапевтической эффективности противоопухолевого препарата полученного путем целенаправленной модификации транскриптомного профиля гемопоэтических стволовых и прогенеторных клеток (СК и ПК), используемых для проведения высокотехнологичного комплексного лечения предпочтительно злокачественных глиальных опухолей головного мозга.

Описание, характеристики

Предлагаемый метод включает отбор гемопоэтических стволовых и прогенеторных клеток (СК и ПК), их высевание и инкубирование в культуральном сосуде. Культивируемые опухолевые стволовые клетки, выделяются из культуры глиобластомы человека и осаждаются. Далее их смешивают со средой для культивирования клеток млекопитающих, ресуспендируют и высаживают в культуральные флаконы, после чего культивируют до образования монослоя, который подвергают ферментативной диссоциации, и после его центрифугирования добавляют свежую среду, и снова ресуспендируют. После этого клетки подвергают повторному культивированию с использованием клеточных суспензий, содержащих не менее чем 85-95% жизнеспособных клеток, и по завершению культивирования обрабатывают флуоресцентным маркером, флюоресцирующим при ультрафиолетовом излучении. Часть материала опухоли используют для определения ее гистологического типа.

Технический результат, получаемый при решении поставленной задачи, выражается в обеспечении возможности получения культуры глиобластомы человека, пригодной для лабораторной доклинической молекулярно-биологической оценки терапевтической эффективности противоопухолевого препарата, полученного целенаправленной модификацией транскриптомного профиля гемопоэтических стволовых и прогенеторных клеток, обеспечивающего возможность регуляции пролиферативных свойств и ключевых функций опухолевых или «раковых» стволовых клеток.

Научная и практическая значимость

Метод персонифицированной клеточной терапии применяется на завершающем этапе противоопухолевого лечения и проводится как основной инструмент регуляции и контроля функционирования опухолевых стволовых клеток (ОСК).

Преимущества перед известными аналогами

Предлагаемый метод персонифицированной клеточной терапии является логическим продолжением существующих в современной онкологии конвенциональных подходов. Он является завершающим этапом противоопухолевого лечения и проводится после завершения циторедуктивного, цитостатического, цитотоксического лечения, а также после курса иммунотерапии как основной инструмент регуляции и контроля функционирования опухолевых стволовых клеток (ОСК).

Область применения

Медицина, онкология.

Правовая защита

Подготовлена заявка на патент: «Способ культивирования стволовых клеток млекопитающего» Заявка на изобретение № 2014149234, дата приоритета 05.12.2014

Стадия готовности к практическому использованию

Выполнен прототип методики, основываясь на котором будет представлена универсальная технология практического получения клеточного препарата для лечения глиальных опухолей головного мозга.

Авторы

Брюховецкий И.С., Мищенко П.В., Толок Е.В., Зайцев С.В., Брюховецкий. А.С.