Разработка тест-системы для сравнения роли драйверных мутаций онкогенов в процессе развития опухолей, на основе оценки геномной нестабильности
Название проекта:
Разработка тест-системы для сравнения роли драйверных мутаций онкогенов в процессе развития опухолей, на основе оценки геномной нестабильности
Номер соглашения:
21-75-00100
Руководитель проекта:
Гончаров Николай Владимирович
Сроки выполнения:
27.07.2021-30.06.2023
Основные полученные результаты:
Подводя итог выполненных работ в рамках проекта РНФ № 21-75-00100 «Разработка тест-системы для сравнения роли драйверных мутаций онкогенов в процессе развития опухолей, на основе оценки геномной нестабильности» за весь период выполнения проекта. Бала доказана возможность использования тест-системы HT1080 HAC/dGFP для поиска и анализа миссенс-мутаций в патогенных вариантах генов, оказывающих влияние на трансмиссии хромосом человека. Было проанализировано влияние наиболее распространенных миссенс-мутаций глиом - IDH1R132H, TP53R175H, R273C, R273H, R248Q и R248W на процесс хромосомной трансмиссии. Мы также исследовали чувствительность клеток U87MG, несущих CRISPR/Cas9-редактированные генотипы IDH1R132H/WT и TP53R248Q/R248Q, к противоопухолевым препаратам – паклитакселу, винкристину, этопозиду и темозоломиду. Анализ микроядер и оценка частоты двуцепочечных разрывов подтвердили, что индукция хромосомной нестабильности происходит после экспрессии вариантов генов IDH1R132H и TP53R248Q. Кроме того, эти данные подтвердили значительное влияние обоих генотипов на стабильность генома в отредактированных CRISPR/Cas9 клетках U87MG, несущих IDH1R132H/WT и TP53R248Q/R248Q. В то время как клетки с IDH1R132H/WT демонстрировали более высокую чувствительность к паклитакселу, чем к темозоломиду. Таким образом хромосомная нестабильность может стать потенциальной молекулярной мишенью для разработки комбинированной терапии глиом.
Научная и практическая значимость:
В рамках реализации проекта, была сформулирована гипотеза о возможности адъювантной терапии глиом человека с генотипом IDHR132H/WT, препаратами, вызывающими хромосомную нестабильность. Мы считаем данные результат привлекательными для фарм-компаний, занимающихся поиском и созданием противоопухолевых соединений. А клеточные линии, разработанные в ходе реализации проекта, потенциально коммерциализуемыми в качестве моделей для проведения доклинических испытаний таких соединений.